Skríning aneuploidie sa používa na stanovenie numerických aberácií chromozómov v embryách generovaných in vitro, ktoré sú určené na implantáciu. Je to cytogenetické vyšetrenie, pri ktorom je možné určiť iba numerické aberácie určitých chromozómov. Skríning aneuploidie je teda formou predimplantačnej diagnostiky (PGD).
Čo je skríning aneuploidie?
Termín skríning aneuploidie sa používa na zhrnutie metód cytogenetického vyšetrenia, ktoré môžu naznačovať numerické aberácie v určitých chromozómoch pri oplodnení in vitro (IVF). Skríning aneuploidie môže v zásade poskytnúť náznaky nullosómie, monozómie a polysomie, ako sú napr B. podajte trizómiu.
V nullosómii úplne chýba chromozómový pár, v monozómii chýba jeden homológny chromozóm chromozómového páru a v polysomii existujú viac ako dva homológne chromozómy pre konkrétny chromozómový pár. Najznámejšou polysómiou je trizómia 21, ktorá vedie k Downovmu syndrómu. Pretože väčšina číselných chromozómových aberácií - najmä monozómov - je smrteľná, t. J. Vedie k prirodzeným ukončeniam, potratom alebo mŕtvym narodeniam, do maternice sa implantujú iba embryá bez rozpoznateľných chromozomálnych aberácií.
To by malo zlepšiť úspešnosť IVF, ale určité chromozómové aberácie nie sú nevyhnutne fatálne, ale vedú k abnormalitám a vážnym obmedzeniam v neskoršom živote, ako je napríklad Downov syndróm alebo Turnerov syndróm. Z tohto dôvodu majú niektoré krajiny z etických dôvodov všeobecný zákaz alebo prísne obmedzenia týkajúce sa tohto typu predimplantačnej diagnostiky (PGD).
Funkcia, účinok a ciele
Skríning aneuploidie sa používa iba na oplodnenie in vitro. Najdôležitejším cieľom je preniesť iba embryá bez rozpoznateľných chromozómových aberácií do maternice, aby sa získala najvyššia možná šanca na úspech počas tehotenstva s umelým oplodnením. V zásade je možné rozlišovať medzi dvoma metódami diagnostiky polárneho tela a vyšetrením predimplantačného embrya. Prvá metóda spočíva v skúmaní polárnych telies vaječných buniek, ktoré ešte neboli oplodnené.
Kontroluje sa tu iba možná aneuploidia vaječných buniek. Deje sa tak za predpokladu, že asi 90% aneuploidií je materského pôvodu. Nejde o PGD v užšom zmysle, ale o prefertilizačnú diagnózu, pretože nedošlo k oplodneniu, t. J. K žiadnej fúzii vajíčka so spermatickou bunkou. Naproti tomu skríning aneuploidie na predimplantačnom embryu v ranom štádiu blastuly sa kvalifikuje ako PGD, pretože vyšetrenie sa týka „skutočného“ embryonálneho štádia - aj keď je veľmi skoré, iba niekoľko dní staré.
Pri diagnostike polárnych telies sa dve polárne telieska, ktoré vajíčkové bunky tvoria počas prvej a druhej meiózy pred zlúčením so spermatickými bunkami, odstránia a vyšetria na aneuploidiu. Na stanovenie akejkoľvek aneuploidie, ktorá môže byť prítomná, sa používa tzv. FISH test (fluorescenčná in situ hybridizácia). Doteraz FISH test umožňoval vyšetrenie iba chromozómov 13, 16, 18, 21, 22 a pohlavných chromozómov X a Y. Chromozómy štruktúry dvojitej špirály po meióze sa pripájajú na príslušnú komplementárnu sekvenciu DNA pomocou chromozómovo špecifických sond DNA.
Sondy DNA sú označené rôznymi fluorescenčnými farbami. Homológne chromozómy sa môžu spočítať pod svetelným mikroskopom v poloautomatizovanom procese, takže je možné identifikovať numerické aberácie. Analogicky k diagnostike polárneho tela sa aneuploidný skríning uskutočňuje na embryách pred implantáciou, ktoré sú stále v ranom štádiu blastoméru. Teraz sa však zaoberáme diploidnými množinami chromozómov, ktorých dvojitá špirála sa musí najprv rozdeliť, aby sa iniciovalo spojenie chromozómov s komplementárnymi sondami DNA.
Cieľom skríningu aneuploidie v oboch metódach zostáva pozitívny výber oplodnenej vajíčkovej bunky in vitro pred jej prenosom do maternice, aby sa dosiahla najvyššia možná miera úspešnosti pre požadované tehotenstvo. Veľmi diskutovaný etický problém vzniká z negatívneho výberu, ktorý je automaticky spojený s pozitívnym výberom a ktorý niektorí extrémni kritici radi používajú argumenty na jeho priblíženie sa k eutanázii. Ďalším etickým problémom je použitie IVF na generovanie tzv. Záchranného dieťaťa. Pozitívny výber embryí generovaných in vitro sa môže použiť na kultiváciu všemocných imunokompatibilných kmeňových buniek, ktoré môžu pomocou implantácie zachrániť životy súrodencov s určitými chorobami.
Riziká, vedľajšie účinky a nebezpečenstvá
Samotný skríning aneuploidie, ako aj extrakcia bunkových jadier, ktoré sa majú skúmať, sa uskutočňuje mimo tela, a preto nepredstavuje žiadne priame riziko alebo nebezpečenstvo pre zdravie, a preto nemá žiadne vedľajšie účinky. Skutočné riziká a nebezpečenstvá spočívajú v skutočnosti, že ešte nebol dosiahnutý prínos skríningu anoiploidií na blastoméroch, t. J. Na embryách pred implantáciou, na zvýšenie úspešnosti s ohľadom na požadované tehotenstvo.
Všeobecné systémové problémy vznikajú v dôsledku prehnaných očakávaní presnosti výsledkov skríningu. Platí to pre pozitívny aj negatívny výsledok. Pozitívny výsledok, t. J. Zistila sa najmenej jedna chromozomálna aberácia, je spojený s určitou neistotou. Môže sa stať, že pozitívny výsledok nesprávne vylúči transplantáciu zodpovedajúcej vaječnej bunky, hoci v skutočnosti nejestvuje žiadna chromozómová porucha. Tento typ nesprávnej diagnózy je menej spôsobený samotným postupom ako skutočnosťou, že embryá v štádiu blastuly môžu mať niekoľko buniek s chromozómovými aberáciami.
Na druhej strane si potenciálni rodičia IVF dieťaťa nesmú byť istí, že ak je test aneuploidie negatívny, v skutočnosti neexistuje chromozomálna aberácia. Ďalšie nebezpečenstvo vzniká, keď sa z embrya odstráni potrebný počet buniek. Stáva sa, že bunky odobraté biopsiou odumierajú a nemôžu sa ďalej skúmať. Pretože biopsia už nemôže byť opakovaná na rovnakom embryu, nie je už k dispozícii na transplantáciu, pretože neexistuje žiadny výsledok testu. Diskutuje sa tiež o tom, do akej miery biopsia ovplyvňuje plodnosť embrya, takže je ovplyvnená celková miera úspešnosti tehotenstva.
