ELISA

Z Test ELISA je lekárske laboratórne vyšetrenie, ktorého výsledkom je tzv. reakcia antigén-protilátka. Možno testovať rôzne antigény, ktoré hrajú úlohu v humánnom alebo veterinárnom lekárstve. V Nemecku sú na vykonanie skúšky poverené iba akreditované laboratóriá.

Čo je to postup?

Test ELISA je jednou z takzvaných imunologických metód v lekárskych laboratórnych testoch. Testovací postup sa môže použiť na detekciu proteínových molekúl v širokej škále telových tekutín.

ELISA je skratka pre Stanovenie imunitného sorbentu spojené s enzýmami, Ide preto o anglický názov, ale v nemeckom lekárskom odbore sa etabloval.

Test ELISA je jednou z takzvaných imunologických metód v lekárskych laboratórnych testoch. Testovací postup sa môže použiť na detekciu proteínových molekúl v širokej škále telových tekutín. Detekcia týchto molekúl zase umožňuje vyvodiť závery o určitých chorobách alebo klinických obrazoch, čo je dôvod, prečo lekári tiež podmieňujú svoju diagnostiku výsledkom takéhoto testu ELISA. Skúšobný postup je preto veľmi dôležitý v každodennej klinickej praxi, v ambulancii alebo v nemocnici.

Zodpovedajúce telové tekutiny, napríklad celá krv alebo tekutiny zo kĺbov, sa odosielajú priamo do laboratória po ich odobratí pacientovi. Vzorky sú zvyčajne veľmi naliehavé, pretože pôvodný materiál sa považuje za citlivý a mal by sa vyšetriť čo najskôr. Takzvané prekrývané vzorky môžu viesť k falošne negatívnym výsledkom, pretože patologické proteíny, ktoré sa majú zistiť, sa medzitým znížili alebo úplne rozobrali. Pri analýze ELISA hrá dôležitú úlohu takzvaná predbežná analýza, podozrivé alebo negatívne výsledky by sa mali opakovať, ak existujú klinické príznaky.

Funkcia, účinok a ciele

Testovacie skúmavky a takzvané mikrotitračné doštičky sú nevyhnutné pre správne testovanie v akreditovanom lekárskom laboratóriu. Tieto doštičky s jemnými polokonkávnymi priehlbinami sú vyrobené zo špeciálneho plastu a každá je potiahnutá veľmi špecifickou protilátkou.

Ak je antigén, ktorý sa má detegovať, prítomný v telesnej tekutine, ktorá sa má skúmať, nastáva špecifická reakcia antigén-protilátka podľa takzvaného princípu zámok a kľúč. Laboratórny personál môže vstúpiť do vzorky do misiek buď ručne pomocou pipiet, alebo úplne automaticky. V moderných lekárskych laboratóriách sa na diagnostiku ELISA používajú iba plne automatizované systémy.

Musí ich však monitorovať školený personál, lekársko-technickí asistenti. Za takzvanú internú a externú kontrolu kvality sú zodpovední aj pracovníci laboratória, nadriadení zdravotníckemu personálu pre laboratórne lekárstvo, epidemiológiu infekcií a mikrobiológiu. Po prvom pokuse, t.j. po pipetovaní materiálu na platne, sa špecifické antigény vo vzorke, ak sú prítomné, už viazali na protilátky na plastovej platni.

Potom nasleduje premývací cyklus fyziologickým roztokom, aby sa zo šarže odstránili rušivé faktory, ako sú nežiaduce antigény alebo proteíny. Tento krok je veľmi dôležitý, aby sa zabránilo falošne pozitívnym reakciám. Údajne pozitívny výsledok, ktorý laboratórium nesprávne interpretuje, môže mať za určitých okolností pre pacienta fatálne následky. V druhom kroku skúmania sa pridá ďalšia protilátka, ktorá je spojená s enzýmom. Táto značená protilátka sa tiež viaže na antigén.

V treťom a poslednom kroku sa v definovanom množstve pridá špeciálne farbivo, ktoré sa vo väčšej alebo menšej miere rozdelí podľa zvyškov enzýmov. Môže sa štiepiť iba ten enzým, ktorý sa predtým neviazal na antigén spolu s protilátkou. Voľný enzým je schopný štiepiť pridané farbivo. Presné množstvo štiepeného farbiva sa môže určiť ďalšou metódou lekárskeho laboratória, takzvanou fotometriou. To umožňuje vyvodiť presný záver, či a ako je antigén prítomný vo vzorke.

Test ELISA sa používa nielen na úvodnú diagnózu alebo na zdôvodnenie podozrenia na diagnózy pri určitých chorobách a klinických obrazoch, ale aj na monitorovanie ich postupu. Ak sa koncentrácia antigénu v teste v priebehu liečby zníži, liečba sa považuje za úspešnú.

Svoje lieky nájdete tu

➔ Lieky na posilnenie obranného a imunitného systému

Riziká, vedľajšie účinky a nebezpečenstvá

Test ELISA je obzvlášť informatívny prostredníctvom detekcie antigénnych štruktúr v telesných tekutinách. Test umožňuje tzv. Kvalitatívne, ale aj semikvantitatívne a kvantitatívne vyjadrenie o predpokladanej prítomnosti určitých antigénov v telových tekutinách.

Na vyšetrenie nie je možné použiť celú krv, iba krvné sérum. Priamy test na pacientovi, napríklad z kapilárnej krvi z končeka prsta, nie je preto, rovnako ako pri iných sérologických testoch, doteraz možný. V humánnej medicíne sa test ELISA primárne používa na detekciu antigénov pri bakteriálnych, vírusových alebo plesňových infekciách. Okrem toho sa všetky pozitívne výsledky sérologickej hepatitídy opäť kontrolujú pomocou testu ELISA ako štandardu.

Určité hormóny, ako je tehotenský hormón HCG, sa môžu tiež stanoviť pomocou testu ELISA. Ak sa počas tehotenstva vyskytnú určité komplikácie, je pre diagnostické a terapeutické použitie veľmi dôležitá presná znalosť koncentrácie tehotenského hormónu v krvi. Ďalšou oblasťou indikácie pre tento test je detekcia takzvaných paraproteínov v moči, ktoré sa vyskytujú napríklad pri rôznych nádorových ochoreniach, ako je napríklad mnohopočetný myelóm.

Test ELISA sa v súčasnosti stále vykonáva v mnohých laboratórnych ústavoch, odborníci ho však považujú za neaktuálny. Enzymatická imunitná reakcia v teste ELISA bola v posledných rokoch stále viac nahradená rádioaktívne značenými protilátkami, ktoré poskytujú ešte lepšie kvantitatívne výsledky. Tieto testy sú známe aj ako RIA, Radio Immunoabsorbent Assay. Ďalším špecifickým ďalším vývojom ELISA sú ľahké chemické metódy, ako je luminiscencia alebo fluorescencia.